थप जान्नको लागि सेल संस्कृतिको परिचय

1. सेल संस्कृति के हो?
सेल कल्चर भन्नाले जनावर वा बिरुवाबाट कोशिकाहरू हटाउने र त्यसपछि अनुकूल कृत्रिम वातावरणमा हुर्काउनु हो।कोशिकाहरूलाई तन्तुबाट सीधै लिन सकिन्छ र कल्चर गर्नु अघि इन्जाइम्याटिक वा मेकानिकल माध्यमद्वारा तोड्न सकिन्छ, वा तिनीहरू स्थापित सेल लाइनहरू वा सेल लाइनहरूबाट व्युत्पन्न गर्न सकिन्छ।

2. प्राथमिक संस्कृति के हो?
प्राइमरी कल्चरले कोशिकाहरू टिश्युबाट अलग गरिसकेपछि र सबै उपलब्ध सब्सट्रेटहरू (अर्थात, संगममा पुग्न) ओगटेसम्म उपयुक्त परिस्थितिहरूमा फैलिएपछि संस्कृतिको अवस्थालाई बुझाउँछ।यस चरणमा, कोशिकाहरूलाई निरन्तर वृद्धिको लागि थप ठाउँ प्रदान गर्न ताजा वृद्धि माध्यमको साथ नयाँ कन्टेनरमा स्थानान्तरण गरेर उप-संस्कृति हुनुपर्छ।

2.1 सेल लाइन
पहिलो उपसंस्कृति पछि, प्राथमिक संस्कृतिलाई सेल लाइन वा सबक्लोन भनिन्छ।प्राथमिक संस्कृतिहरूबाट व्युत्पन्न सेल लाइनहरूको सीमित आयु हुन्छ (अर्थात तिनीहरू सीमित छन्; तल हेर्नुहोस्), र तिनीहरू बित्दै जाँदा, उच्चतम वृद्धि क्षमता भएका कोशिकाहरू हावी हुन्छन्, फलस्वरूप जनसङ्ख्यामा एक निश्चित डिग्री जीनोटाइप फेनोटाइपसँग निरन्तर रहन्छ।

2.2 सेल तनाव
यदि कोष रेखाको उप-जनसंख्या क्लोनिङ वा कुनै अन्य विधिद्वारा संस्कृतिबाट सकारात्मक रूपमा चयन गरिएको छ भने, सेल रेखा सेल स्ट्रेन बन्नेछ।कोशिका तनावहरूले सामान्यतया अभिभावकीय रेखा सुरु भएपछि अतिरिक्त आनुवंशिक परिवर्तनहरू प्राप्त गर्दछ।

3. सीमित र निरन्तर सेल लाइनहरू
सामान्य कोशिकाहरू प्रजनन क्षमता गुमाउनु अघि सामान्यतया सीमित संख्यामा मात्र विभाजित हुन्छन्।यो आनुवंशिक रूपमा निर्धारित घटना हो जसलाई सेनेसेन्स भनिन्छ;यी सेल रेखाहरूलाई परिमित सेल लाइनहरू भनिन्छ।यद्यपि, केही सेल लाइनहरू परिवर्तन भनिने प्रक्रिया मार्फत अमर हुन्छन्, जुन सहज रूपमा हुन सक्छ वा रसायन वा भाइरसद्वारा प्रेरित हुन सक्छ।जब एक परिमित सेल रेखा परिवर्तन हुँदै जान्छ र अनिश्चित कालका लागि विभाजन गर्ने क्षमता प्राप्त गर्दछ, यो एक निरन्तर सेल रेखा हुन्छ।

4. संस्कृति अवस्था
प्रत्येक सेल प्रकारको संस्कृति अवस्थाहरू धेरै फरक हुन्छन्, तर कोशिकाहरू संस्कृतिको लागि कृत्रिम वातावरण सधैं उपयुक्त कन्टेनरबाट बनेको हुन्छ, जसमा निम्न समावेश छन्:
4.1 सब्सट्रेट वा कल्चर माध्यम जसले आवश्यक पोषक तत्वहरू प्रदान गर्दछ (एमिनो एसिड, कार्बोहाइड्रेट, भिटामिन, खनिजहरू)
4.2 वृद्धि कारकहरू
४.३ हर्मोन
४.४ ग्यास (O2, CO2)
4.5 विनियमित भौतिक र रासायनिक वातावरण (pH, आसमोटिक दबाव, तापमान)

धेरै जसो कोशिकाहरू एन्कोरेज-निर्भर हुन्छन् र ठोस वा अर्ध-ठोस सब्सट्रेट (अनुयायी वा मोनोलेयर कल्चर) मा कल्चर हुनुपर्छ, जबकि अन्य कोशिकाहरू मध्यम (निलम्बन संस्कृति) मा तैरिन सक्छन्।

5. क्रियो संरक्षण
यदि उपसंस्कृतिमा अतिरिक्त कोशिकाहरू छन् भने, तिनीहरूलाई उपयुक्त सुरक्षात्मक एजेन्ट (जस्तै DMSO वा ग्लिसरोल) द्वारा उपचार गरिनुपर्छ र तिनीहरूलाई आवश्यक नभएसम्म -130 डिग्री सेल्सियस (क्रायोप्रिजर्भेसन) भन्दा कम तापक्रममा भण्डारण गर्नुपर्छ।कोशिकाहरूको उपसंस्कृति र क्रायोप्रीजरभेसनको बारेमा थप जानकारीको लागि।

6. संस्कृतिमा कोशिकाहरूको आकृति विज्ञान
संस्कृतिमा कोशिकाहरूलाई तिनीहरूको आकार र रूप (अर्थात मोर्फोलजी) को आधारमा तीन आधारभूत कोटिहरूमा विभाजन गर्न सकिन्छ।
6.1 फाइब्रोब्लास्ट कोशिकाहरू द्विध्रुवी वा बहुध्रुवीय हुन्छन्, तिनीहरूको लामो आकार हुन्छ, र सब्सट्रेटसँग जोडिएको हुन्छ।
6.2 एपिथेलियल-जस्तै कोशिकाहरू बहुभुज हुन्छन्, तिनीहरूको नियमित आकार हुन्छ, र अलग पानाहरूमा म्याट्रिक्ससँग जोडिएको हुन्छ।
6.3 लिम्फोब्लास्ट-जस्तै कोशिकाहरू गोलाकार हुन्छन् र सामान्यतया सतहमा संलग्न नगरी निलम्बनमा बढ्छन्।

7. सेल संस्कृति को आवेदन
सेल कल्चर सेल र आणविक जीवविज्ञानमा प्रयोग हुने मुख्य उपकरणहरू मध्ये एक हो।यसले कोशिकाहरूको सामान्य फिजियोलोजी र बायोकेमिस्ट्री (जस्तै मेटाबोलिक अनुसन्धान, बुढ्यौली), कोशिकाहरूमा लागूपदार्थ र विषाक्त यौगिकहरूको प्रभाव, र म्युटाजेनेसिस र कार्सिनोजेनिक प्रभावहरू अध्ययन गर्न उत्कृष्ट मोडेल प्रणाली प्रदान गर्दछ।यो औषधि परीक्षण र विकास र जैविक यौगिकहरू (जस्तै भ्याक्सिन, उपचारात्मक प्रोटिन) को ठूलो मात्रामा निर्माणको लागि पनि प्रयोग गरिन्छ।यी कुनै पनि अनुप्रयोगहरूको लागि सेल संस्कृति प्रयोग गर्ने मुख्य फाइदा परिणामहरूको स्थिरता र पुन: उत्पादन क्षमता हो जुन क्लोन कक्षहरूको ब्याच प्रयोग गरेर प्राप्त गर्न सकिन्छ।